Une mesure de la propreté

Un scientifique du Centre de lutte contre le cancer de l'UNM développe et valide une méthode pour tester les surfaces à la recherche de particules virales.

Les cabinets médicaux et les hôpitaux nettoient méticuleusement l'équipement médical non jetable qu'ils utilisent à plusieurs reprises. Les équipements qui ne peuvent pas être stérilisés à la chaleur doivent être nettoyés avec des désinfectants puissants. Michelle Ozbun, PhD, une experte internationale sur les virus, voulait savoir à quel point ces désinfectants sont réellement efficaces.

Ozbun et son équipe ont développé un moyen de mesurer le nombre de particules de virus du papillome humain infectieuses laissées sur une surface après sa désinfection. Ils ont constaté que les désinfectants approuvés pour une utilisation sur les dispositifs médicaux fonctionnent bien, et ils ont récemment ont publié leur travail en ligne dans la revue The Lancet EBioMedicine.

Ozbun est professeur d'obstétrique et de gynécologie et de génétique moléculaire et de microbiologie à l'Université du Nouveau-Mexique. Ses recherches portent sur le VPH, qui cause plus de 90 % des cancers du col de l'utérus et de l'anus et plus de 70 % des cancers du vagin et de la gorge, selon les Centers for Disease Control and Prevention.

Elle explique que les particules HPV, comme tous les virus, doivent envahir une cellule pour produire des copies d'elles-mêmes. Et pour envahir une cellule, la capside de la particule virale doit être intacte.

La capside est l'enveloppe externe d'une particule virale. Il est composé de protéines virales et renferme le matériel génétique du virus, qui code ces protéines. Certains virus, appelés virus enveloppés, ont une couche de molécules ressemblant à de la graisse recouvrant les protéines virales.

"Le coronavirus, le VIH et l'herpèsvirus sont tous des virus enveloppés", explique Ozbun. « Ils sont beaucoup plus susceptibles de se dessécher sur une surface. Et s'ils se dessèchent, ils ne sont pas contagieux.

Les virus comme le VPH, le poliovirus et le norovirus ont des capsides constituées uniquement de protéines, ce qui signifie qu'ils peuvent rester longtemps sur les surfaces sans être inactivés, explique Ozbun. "Et donc", dit-elle, "ils sont également beaucoup plus difficiles à inactiver par les désinfectants."

Parce que le VPH ne tue pas les cellules, la seule façon de détecter sa présence – jusqu'à présent – ​​a été de prélever un échantillon de cellules, de les broyer et de rechercher le matériel génétique pour les gènes du virus.

« Quand les gens sur le terrain cherchent à savoir si les gens ont le VPH », dit Ozbun, « ils ne font en réalité que détecter les génomes viraux qui s’y trouvent. Ils ne savent pas [si] ces génomes viraux sont emballés à l'intérieur de la capside. Et une fois les cellules broyées, il devient impossible de compter le nombre de particules HPV intactes.

Un autre problème avec la méthode de broyage, explique Ozbun, est que l'intérieur des cellules est mélangé. Il n'y a aucun moyen de savoir si de nombreuses cellules de l'échantillon sont infectées par un faible niveau de produits viraux ou si seulement quelques cellules sont infectées par un grand nombre de produits viraux.

Ozbun avait besoin de méthodes plus sensibles, alors elle les a créées.

Tout d'abord, Ozbun et son équipe ont obtenu des échantillons viraux de trois sources. Ils ont fait pousser des particules de VPH dans le laboratoire d'Ozbun, ils ont obtenu des échantillons de VPH d'un autre laboratoire et ils ont collecté des échantillons de VPH de patients au Nouveau-Mexique. Ensuite, ils ont infecté des cellules dans un laboratoire avec les échantillons viraux. Mais ensuite, ils ont fait quelque chose de différent : au lieu de broyer les cellules, ils ont ajouté un colorant qui se lie à l'ARN viral et ont pris des images des cellules.

Les images d'Ozbun montrent des cellules intactes contenant de l'ARN viral. À l'aide de techniques microscopiques sophistiquées développées à l'UNM Comprehensive Cancer Center, elle et son équipe sont en mesure de compter le nombre de cellules infectées, ce qui leur permet de calculer le nombre de particules virales présentes.

En utilisant leurs images et leurs méthodes de comptage, Ozbun et son équipe ont pu montrer que les désinfectants couramment utilisés réduisent le nombre de particules virales d'au moins 10,000 XNUMX fois. Ils ont montré que les désinfectants avaient des résultats similaires quelle que soit la source virale. Et ils ont montré que leurs méthodes étaient sensibles à la gamme de particules que la plupart des hôpitaux et des cabinets médicaux rencontrent normalement.

Sa nouvelle méthode, dit Ozbun, « est un moyen important de différencier la quantité d'acide nucléique présente par rapport à ce qui est vraiment infectieux. C’est la seule façon de connaître le nombre de particules infectieuses. »

Ozbun explique en outre que de nombreuses procédures de nettoyage nécessitent que l'équipement soit lavé avant d'être désinfecté. Le lavage élimine de nombreuses particules infectieuses avant l'utilisation du désinfectant.

Le résultat, dit-elle, est que les hôpitaux et les cabinets de médecins « ont un niveau de confiance encore plus élevé qu'ils n'exposeront pas les patients à un virus laissé par quelqu'un d'autre ».

À propos de Michelle Ozbun, PhD

Michelle Ozbun est professeure dans les départements d'obstétrique et de gynécologie et de génétique moléculaire et de microbiologie. Elle est professeure Maralyn S. Budke en oncologie virale et co-dirige le programme de recherche en oncologie cellulaire et moléculaire au Centre de lutte contre le cancer UNM.

Référence papier       

"Titres infectieux de papillomavirus humains (HPV) dans les lésions des patients, considérations méthodologiques dans l'évaluation de l'infectivité du HPV et implications pour l'efficacité des désinfectants de haut niveau» a été publié en ligne en janvier 2021, dans EBioMedicine par The Lancet. Les auteurs sont : Michelle A. Ozbun, PhD ; Virginie Bondu, MA; Nicole A. Patterson, BS; Rosa T. Sterk, BS; Alan G. Waxman, MD; Erica C. Bennett, MD; Rohini McKee, MD; Ankur Sharma, MD ; Jeremy Yarwood, Ph.D. ; Marc Rogers, Ph.D. ; et Gary Eichenbaum, PhD.